通过以往的超数排卵诱导方法获得的转基因小鼠(敲除小鼠)的卵子平均数量约为20个,但实际上数量通常要少得多,约为10个或更少。然而,熊本大学的研究人员开发了一种超数排卵的方法,成功地从一只雌性老鼠体内排出了100个卵子。
通过体外受精和胚胎移植,已经证实了正常的2细胞胚胎生长和来自这些卵子的后代。预计这一成果将成为未来大规模生产敲除小鼠非常有用的技术。
诱导超数排卵的方法是由熊本大学动物资源与发展中心(CARD)生殖工程系的Naomi Nakagata教授和Torutako博士开发的。结果于2015年5月29日在PLOS ONE上发布。
最近发现,编码人类蛋白质的基因数量不到人类基因组的2%,数量超过2万个。科学界用敲除小鼠分析基本表型(遗传特征的出现)来分析如此大量基因的功能。因此,有必要有效地产生敲除小鼠。
在诱导超数排卵的常规方法中,将妊娠母马血清促性腺激素(PMSG)(卵泡刺激素(FSH))应用于敲除小鼠以发育大量卵泡。然而,从雌性老鼠身上获得的卵子实际数量最多限于30个。
Nakagata教授和他的同事们提出了在超数排卵过程中加入抑制素抗血清的想法。激素抑制素在性腺发育过程中释放,是卵泡刺激素的分泌调节剂。卵泡刺激素是由垂体分泌的,这限制了排卵期间产卵的数量。抑制素抗血清的使用可以通过中和雌性敲除小鼠体内的抑制素来促进卵泡刺激素的过量分泌。此外,通过同时应用PMSG,小鼠产生了大量的卵泡,导致敲除小鼠成功排卵100个或更多的卵,这大约是常规方法的3-4倍。
“利用我们新开发的方法,用于采卵的雌性敲除小鼠数量可减少1/3-1/4或更少。”武夫博士说,他参与了该计划的开发。“减少实验动物数量是实验动物福利最重要的支柱之一。不仅是从生命科学研究的角度,更是从社会对实验动物福利的关注。这一结果非常有意义,我们希望这一成就将有助于促进各种国际知名的研究。”
通过允许少数雌性小鼠大量排卵,试管婴儿和胚胎移植可以更容易地进行。因此,可以提高收集、储存和提供敲除小鼠的效率。
Nakagata教授预测,他的超数排卵诱导方法对大鼠、仓鼠和豚鼠具有很高的潜力,但尚未确定。他希望很快将这种方法的范围扩大到其他实验动物。
计划未来从合作制药公司释放排卵诱导剂。
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