导读 2021年12 月 13 日——一种涉及以极快的速度冷却活细胞的新方法,导致细胞生物分子在被捕时以其自然排列方式得到前所未有的保存。该技术
2021年12 月 13 日——一种涉及以极快的速度冷却活细胞的新方法,导致细胞生物分子在被捕时以其自然排列方式得到前所未有的保存。该技术的详细信息于 12 月 10 日发表在《科学进展》 上。
多种技术可用于评估微米和纳米尺度的分子模式。其中一些技术包括荧光显微镜、单分子定位显微镜、具有最小光子通量的纳米镜、超分辨率径向波动 (SRRF) 和受激发射耗尽纳米镜。
然而,这些成像方法的空间和光谱分辨率受到有限光子通量和光漂白(光致破坏)引起的运动模糊的限制。由于这些限制,许多分子模式的瞬态在很大程度上仍然无法获得。
成像中的模糊和光子问题
在荧光显微镜中,可以延长曝光时间以增加检测到的光量。然而,微观结构永远不会静止,而是不断运动。延长曝光时间从而导致结构模糊。
此外,光子催化过程会产生有毒自由基。这导致分子过程的破坏,细胞的最终死亡,甚至荧光分子的破坏。分子运动可以被化学固定取代,但固定过程需要几分钟且不完整,导致样品发生内在变化。另一方面,细胞可以极快地冷却,但仍然会发生冰晶对细胞结构的机械破坏。
解决方案可能是非常酷的成像
为了克服这些基本限制,马克斯普朗克分子生理学研究所系统细胞生物学系的研究人员在 Philippe Bastiaens 博士小组的 Jan Huebinger 博士领导下,开发了一种称为超快速冷冻的技术。Cryoarrest 在几毫秒内直接在荧光显微镜上冻结分子活动模式。
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