监视单元构建块的对齐方式对于了解单元的构建方式非常重要。通过与MBL的成像科学家合作,研究人员开发了一种名为POLArIS的新探针,可以对活细胞中的分子方向进行实时成像。
荧光团在发光时会发出偏振光。偏振荧光的取向与荧光团的取向紧密相关。如果感兴趣的分子与诸如绿色荧光蛋白(GFP)的荧光标签刚性连接,则来自荧光团的偏振荧光将报告该分子的方向。
这项研究的主要作者之一Ayana Sugizaki说:“在以前的监测目的蛋白方向的方法中,研究人员需要开发有效的受约束的GFP标签方法,每种目的蛋白可能会有所不同。”“ POLArIS使用与GFP牢固连接的类似抗体的结合剂,可以进行特异性和通用的限制性标记,”另一位主要作者佐藤启介(Keisuke Sato)补充道。该团队使用市售的Adhiron分子(现在更名为“ Affimer”)作为结合分子将GFP与靶蛋白连接,并通过旋转约束方式将Adhiron和GFP连接来开发POLArIS(图1)。由于可以通过噬菌体展示筛选从分子库中轻松选择与目标分子特异性结合的Adhiron分子,POLArIS可以设计用于任何感兴趣的生物分子。POLArIS可以在特定的细胞类型和细胞器中表达,将对研究广泛的细胞培养物,组织和整个生物体中分子装配体的结构动力学非常有用。“从荧光偏振成像的角度来看,POLArIS具有遗传上的优势,因此具有明显的优势,”国立先进工业科学技术研究院(AIST)的高级研究员Tomomi Tani说。自从他是MBL的副科学家以来,他一直从事这个项目。组织和整个生物。“从荧光偏振成像的角度来看,POLArIS具有遗传上的优势,因此具有明显的优势,”国立先进工业科学技术研究院(AIST)的高级研究员Tomomi Tani说。自从他是MBL的副科学家以来,他一直从事这个项目。组织和整个生物。“从荧光偏振成像的角度来看,POLArIS具有遗传上的优势,因此具有明显的优势,”国立先进工业科学技术研究院(AIST)的高级研究员Tomomi Tani说。自从他是MBL的副科学家以来,他一直从事这个项目。
通过使用肌动蛋白探针,研究小组发现了海星胚胎分裂细胞中高度有序的F-肌动蛋白结构(称为FLARE结构)的瞬时出现和溶解。通讯作者Sumio Terada说:“我们发现该结构与星形微管相关联地延伸到了细胞皮层。”他曾与他在TMDU的同事经常从东京来MBL参观。“星形微管负责将纺锤体连接到细胞皮层并正确定向,从而控制细胞分裂的平面。”确定细胞分裂平面的机制是控制发育的许多方面的关键,但仍然是一个关键的谜。径向排列的肌动蛋白结构的发现将阐明细胞生物学最基本的未解决问题。
标签: 偏振荧光探针
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