导读 慕尼黑大学的研究人员开发了一种方法来确定使用超分辨率荧光显微镜标记目标蛋白的可靠性。现代显微镜技术使得以惊人的细节检查细胞的内部运...
慕尼黑大学的研究人员开发了一种方法来确定使用超分辨率荧光显微镜标记目标蛋白的可靠性。
现代显微镜技术使得以惊人的细节检查细胞的内部运作成为可能。 “我们现在可以在显微镜下观察单个蛋白质的排列和相互作用,”慕尼黑大学生命分子物理学主席兼 MPI 生物化学马克斯·普朗克研究员 Ralf Jungmann 教授说。
这位生物物理学家的团队最近开发了革命性的RESI(顺序成像分辨率增强)方法。该技术可用于将荧光显微镜的分辨率提高至埃级——远低于光的经典衍射极限。研究人员将 DNA 标记分子精确地附着在他们想要更好地理解的分子上,对此至关重要。
Jungmann 的团队现已在《自然方法》杂志上提出了一项技术,可用于量化生物标记分子与目标蛋白质的结合程度。 “如果你想做出定量可靠的陈述,这绝对是至关重要的,”物理学家解释道。
如果知道标记效率,就可以通过这种方式进行空间分辨蛋白质组学。这使您不仅可以了解单个蛋白质在细胞中的作用,还可以了解它们存在的程度以及它们的数量和行为在某些情况下如何变化。 “但这只有在我们能够评估标签效果的情况下才有可能。”这是因为只有标记的蛋白质在显微镜下才会发出闪光,从而变得可见。
Jungmann 团队开发的方法通过向目标蛋白添加参考生物标志物使这种评估成为可能。该标记在显微镜检查过程中以不同的颜色“发光”,因此成功标记的蛋白质以两种颜色出现。
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