在过去的二十年里,显微镜在速度和分辨率方面取得了前所未有的进步。然而,细胞结构本质上是三维的,传统的超分辨率技术通常在所有三个方向上都缺乏必要的分辨率来捕捉纳米尺度的细节。由哥廷根大学领导的一个研究小组,包括美国维尔茨堡大学和美国癌症研究中心,研究了一种超分辨率成像技术,该技术涉及结合两种不同方法的优势以在所有三个维度上实现相同的分辨率;这是各向同性分辨率。结果发表在《科学进展》上。
尽管显微镜技术取得了巨大进步,但在所有三个维度的分辨率之间仍然存在显着差距。可以缩小这一差距并实现纳米级分辨率的方法之一是金属诱导能量转移(MIET) 成像。MIET 成像的卓越深度分辨率与单分子定位显微镜的卓越横向分辨率相结合,特别是与称为直接随机光学重建显微镜 (dSTORM) 的方法相结合。基于这种组合的新技术使研究人员能够实现亚细胞结构的各向同性三维超分辨率成像. 此外,研究人员实施了双色 MIET-dSTORM,使他们能够在三个维度上对两种不同的细胞结构进行成像,例如微管和网格蛋白涂层凹坑——细胞内的微小结构——它们一起存在于同一区域。
“通过结合已建立的概念,我们开发了一种用于超分辨率显微镜的新技术。它的主要优点是尽管使用相对简单的设置,但它可以在三个维度上实现极高的分辨率,”该研究的第一作者 Jan Christoph Thiele 博士说。出版,哥廷根大学。“这将是一个强大的工具,具有众多应用,可以以亚纳米精度解析蛋白质复合物和小细胞器。每个能够使用具有快速激光扫描仪和荧光寿命测量能力的共聚焦显微镜技术的人都应该尝试这种技术,”Dr. 博士说。 Oleksii Nevskyi,通讯作者之一。
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