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计数板计数原则(计数板)

导读 关于计数板计数原则,计数板这个问题很多朋友还不知道,今天小六来为大家解答以上的问题,现在让我们一起来看看吧!1、血球计数板   1

关于计数板计数原则,计数板这个问题很多朋友还不知道,今天小六来为大家解答以上的问题,现在让我们一起来看看吧!

1、血球计数板   1 血球计数板 .视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍),以每小格的菌数可数为度。

2、 2.取洁净的血球计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片。

3、   3.将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区,勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。

4、也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)。

5、   4.静置片刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。

6、将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数。

7、由于生活细胞的折光率和水的折光率相近,观察时应减弱光照的强度。

8、   5.计数时若计数区是由16个大方格组成,按对角线方位,数左上、左下、右上、右下的4个大方格(即100小格)的菌数。

9、如果是25个大方格组成的计数区,除数上述四个大方格外,还需数中央1个大方格的   血球计数板    血球计数板 菌数(即80个小格)。

10、为了保证计数的准确性,避免重复计数和漏记,在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。

11、如菌体位于大方格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差。

12、即位于本格上线和左线上的细胞计入本格,本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。

13、见右图:即本格中计数细胞为3个。

14、6.对于出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算。

15、每个样品重复计数2-3次(每次数值不应相差过大,否则应重新操作),按公式计算出每mL(g)菌悬液所含细胞数量。

16、   7.测数完毕,取下盖玻片,用水将血球计数板冲洗干净,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。

17、洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保存。

18、 以计数酵母菌为例   (1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.   (2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.   (3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.   (4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.   (5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.   (6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).   (7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.   3.计算公式   (1)16格×25格的血球计数板计算公式:   酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×10四次方×稀释倍数   (2)25格x16格的血球计数板计算公式:   酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×10四次方×稀释倍数   4.血球计数板的清洁   血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.。

本文分享完毕,希望对大家有所帮助。

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